PCR 시약에서 Glycerol-Free 효소가
필요한 이유는 무엇일까?
일반적인 PCR에서는 크게 신경 쓰지 않았던 glycerol이 동결건조 PCR 시약이나 분자진단 키트 개발에서는 중요한 formulation 조건이 될 수 있습니다. Glycerol-Free enzyme이 필요한 이유와 적용 가능한 제품군을 살펴봅니다.
Taq DNA polymerase, reverse transcriptase, RNase inhibitor 등 많은 효소 제품에는 효소의 안정성을 유지하기 위해 glycerol이 포함되어 있습니다.
일반적인 liquid PCR workflow에서는 이러한 formulation이 문제가 되지 않는 경우가 많습니다. 하지만 동결건조(Lyophilization), premix 개발, point-of-care molecular diagnostics처럼 최종 reagent formulation 자체가 중요한 경우에는 이야기가 달라질 수 있습니다.
효소에는 왜 Glycerol이 들어갈까?
Glycerol은 단백질 효소의 안정적인 보관을 위해 널리 사용되는 formulation component입니다. 특히 냉동 상태에서 효소를 안정적으로 유지하고 반복적인 사용 과정에서 activity를 유지하는 데 도움이 될 수 있습니다.
따라서 conventional PCR enzyme에서는 glycerol-containing formulation을 흔히 볼 수 있습니다.
그런데 왜 Glycerol-Free가 필요할까?
동결건조 reagent를 개발할 때는 효소뿐 아니라 전체 formulation의 excipient 조성을 함께 설계해야 합니다.
개발자가 glycerol 농도를 직접 조절해야 하는 경우 glycerol-free raw enzyme이 formulation 자유도를 높일 수 있습니다.
장기 보관성과 사용 편의성을 고려한 진단용 PCR reagent 개발에서 원료 formulation은 중요한 설계 요소가 됩니다.
LAMP와 같은 isothermal amplification system에서도 glycerol-free polymerase와 reverse transcriptase를 활용할 수 있습니다.
Hzymes Molecular Biology Raw Materials
Hzymes의 Molecular Product Selection Guide에는 PCR 및 LAMP reagent 개발을 위한 다양한 glycerol-free enzyme이 포함되어 있습니다.
| Product | Application |
|---|---|
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Hot-start Taq DNA Polymerase (Antibody Modified; Glycerol-Free) |
PCR / qPCR reagent development |
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FS Hotstart Taq DNA Polymerase (Antibody Modified; Glycerol-Free) |
PCR formulation development |
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M-MLV Reverse Transcriptase (Glycerol-Free) |
RT-PCR / RT-qPCR |
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RNase Inhibitor (Glycerol-Free) |
RNA amplification workflows |
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Heat-Labile UDG (Glycerol-Free) |
Carryover contamination control |
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Bst DNA Polymerase V2 (Glycerol-Free) |
LAMP / Isothermal amplification |
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RTL Reverse Transcriptase 2.0 (Glycerol-Free) |
RT-LAMP |
효소만 바꾸면 동결건조 PCR reagent가 완성될까?
그렇지는 않습니다.
Lyophilized PCR reagent의 성능은 polymerase뿐 아니라 buffer, dNTP, stabilizer, primer/probe, salt concentration 및 동결건조 process 조건 등 여러 요소의 영향을 받을 수 있습니다.
따라서 commercial molecular diagnostic reagent를 개발하는 경우에는 단순히 개별 효소를 선정하는 것을 넘어 전체 master mix와 lyophilization condition을 함께 검토해야 합니다.
Liquid부터 Lyophilized Beads까지
Hzymes의 PCR 및 LAMP 제품군에는 raw enzyme뿐 아니라 Liquid Lyoph-Ready, Freeze-Dryable Liquid, Lyophilized Beads 및 In Situ Lyophilization 형태의 master mix도 포함되어 있습니다.
또한 PCR 및 LAMP reagent에 대해 primer/probe design, reagent performance optimization, lyophilization process development, CDMO, OEM 및 custom kit development 서비스도 제공합니다.
PCR / LAMP 원료를 찾고 계신가요?
알앤디메이트에서 Glycerol-Free enzyme, Hot-start Taq, Reverse Transcriptase, RNase Inhibitor, UDG, Bst Polymerase, dNTP 및 PCR/LAMP Master Mix 등 필요한 분자진단 원료의 사양과 공급 가능 여부를 확인해드립니다.
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